El ensayo es un IEE competitivo para la medición cuantitativa de Estrone-3
-Glucuronido (E1G) en orina humano. Se diluyen las muestras de orina en
tampon de ensayo y la Estrone-3 -Glucuronido en la muestra se incuba con un
anticuerpo conejo anti-Estrone-3 -Glucuronido y Estrone-3 -Glucuronido
marcado con fosfatasa. Se obtiene la separación de Estrone-3 -Glucuronido
unido al anticuerpo de Estrone-3 -Glucuronido no unido al anticuerpo
mediante un reactivo de separación magnético de IgG anti-conejo.Una
incubación ulterior con sustrato produce color en proporción inversa a la
cantidad de Estrone-3 -Glucuronido presente. El ensayo tiene cuatro etapas
principales:
Muestras de orina y patrones de Estrone-3-Glucuronide se preparar paradilución en tampon de ensayo.
El Estrone-3 -Glucuronido marcada con fosfatasa alcalina, el anticuerpoanti-Estrone-3
Glucuronido y el IgG magnético anti-conejo se someten con la muestra (500 µL) durante 2 horas a 37°C, seguida por 2 pasos de lavado magnético.
Se incuba un sustrado enzimático coloreado con las partículas durante 1 hora a 37°C. La presencia de la fosfatasa alcalina provoca un cambio de color de amarillo a rosado. La reacción es terminada por la adición de Buffer de Parada.
Luego los tubos se colocan en el espectrofotómetro o colorímetro. Se puede medir la densidad óptica de cada tubo (a 550/492nm) y los resultados se calculan usando un programa de procesamiento de datos.
El Juego Contiene
Patron de IEE de E1G Anticuerpo de IEE de E1G Marcaje Enzimático de IEE de E1G Reactivo de Separación de IEE de E1G Buffer de Ensayo de IEE de E1G
Buffer de Lavado de IEE de E1G Reactivo de Sustrato de IEE Buffer de Sustrato de IEE Buffer de Parada de IEE Muestras QC Internas (Bajo y Alto) Folleto de instrucciones
Equipo Reqerido
Tubos de ensayo, pipetas, mezcladora multivortex, separador magnético, baño de maría de 37°C y un colorímetro o espectrofotómetro.