El ensayo es un IEE competitivo para la medición cuantitativa de
Pregnanediol-3a-Glucuronido (PDG) en orina humano. Se diluyen las
muestras de orina en tampon de ensayo y la Pregnanediol-3a-Glucuronido en
la muestra se incuba con un anticuerpo conejo anti-Pregnanediol-3a-
Glucuronido y Pregnanediol-3a-Glucuronido marcado con fosfatasa. Se
obtiene la separación de Pregnanediol-3a-Glucuronido unido al anticuerpo
de Pregnanediol-3a-Glucuronido no unido al anticuerpo mediante un reactivo
de separación magnético de IgG anti-conejo.Una incubación ulterior con
sustrato produce color en proporción inversa a la cantidad de Pregnanediol-
3a-Glucuronido presente. El ensayo tiene cuatro etapas principales:
Muestras de orina y patrones de Pregnanediol-3a-Glucuronide se preparar para dilución en tampon de ensayo.
El Pregnanediol-3a-Glucuronido marcada con fosfatasa alcalina,el anticuerpo anti-Pregnanediol-3a-Glucuronido y el IgG magnético anti-conejo se someten con la muestra (250 µL) durante 2 horas a 37°C, seguida por 2 pasos de lavado magnético.
Se incuba un sustrado enzimático coloreado con las partículas durante 1 hora a 37°C. La presencia de la fosfatasa alcalina provoca un cambio de color de amarillo a rosado. La reacción es terminada por la adición de Buffer de Parada.
Luego los tubos se colocan en el espectrofotómetro o colorímetro. Se puede medir la densidad óptica de cada tubo (a 550/492nm) y los resultados se calculan usando un programa de procesamiento de datos.
El Juego Contiene
Patron de IEE de PDG Anticuerpo de IEE de PDG Marcaje Enzimático de IEE de PDG Reactivo de Separación de IEE de PDG Buffer de Ensayo de IEE de PDG
Buffer de Lavado de IEE de PDG Reactivo de Sustrato de IEE Buffer de Sustrato de IEE Buffer de Parada de IEE Muestras QC Internas (Bajo y Alto) Folleto de instrucciones
Equipo Reqerido
Tubos de ensayo, pipetas, mezcladora multivortex, separador magnético, baño de maría de 37°C y un colorímetro o espectrofotómetro.
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