El ensayo es un IEE ('sandwich') inmunométrico para la medición cuantitativa de TSH en suero o plasma humano. La TSH de la muestra se enlaza a 2 anticuerpos monoclonales anti-TSH dirigidos a diferentes epítopes. Un anticuerpo está enlazado con partículas magnéticas y el otro está marcado con fosfatasa alcalina. El ensayo tiene cuatro etapas principales:
El anti-TSH magnético se somete a incubación con la muestra (100 µL) durante 15 minutos a 37°C seguida por un paso de lavado magnético.
Las partículas magnéticas se someten a incubación con anti-TSH marcado con fosfatasa alcalina, durante 1 hora a 37°C, seguida por 2 pasos de lavado magnético.
Se incuba un sustrato enzimático coloreado, con las partículas durante 1 hora a 37°C. La presencia de la fosfatasa alcalina provoca un cambio de color de amarillo a rosado. La reacción se termina por la adición de Buffer de Parada.
Luego los tubos se colocan en el espectrofotómetro o colorímetro. Se puede medir la densidad óptica de cada tubo (a 550nm y 492 nm) y los resultados se calculan usando un programa de procesamiento de datos.
Patrones de IEE de TSH - see (*) Anticuerpo Magnético de IEE de TSH Anticuerpo Enzimáticamente Marcado de IEE de TSH Buffer de Ensayo de IEE de TSH Buffer de Lavado de IEE de TSH
Reactivo de Sustrado de IEE Buffer de Sustrado de IEE Buffer de Parada de IEE Muestra QC Interna de IEE de TSH Folleto de instrucciones
(*) calibrados contra OMS IRP 80/558
Equipo Requerido
Tubos de ensayo, pipetas, mezcladora multivortex, separador magnético, baño de maría de 37°C y un colorímetro o espectrofotómetro