El ensayo es un IEE ('sandwich') inmunométrico para la medición cuantitativa de hCG en suero o plasma humano y para la determinacion cualitativa en la orina. La hCG de la muestra se enlaza a 2 anticuerpos monoclonales anti-hCG dirigidos a diferentes epítopes. Un anticuerpo está enlazado con partículas magnéticas y el otro está marcado con fosfatasa alcalina. El ensayo tiene cuatro etapas principales:
El anti-hCG magnético se somete a incubación con la muestra (100 µL) durante 15 minutos a 37°C seguida por 2 pasos de lavado magnético.
Las partículas magnéticas se someten a incubación con anti-hCG marcado con fosfatasa alcalina, durante 1 hora a 37°C, seguida por 2 pasos de lavado magnético.
Se incuba un sustrato enzimático coloreado, con las partículas durante 30 minutos a 37°C. La presencia de la fosfatasa alcalina provoca un cambio de color de amarillo a rosado. La reacción se termina por la adición de Buffer de Parada.
Luego los tubos se colocan en el espectrofotómetro o colorímetro. Se puede medir la densidad óptica de cada tubo (a 550nm y 492 nm) y los resultados se calculan usando un programa de procesamiento de datos.
Patrones de IEE de hCG - see (*) Anticuerpo Magnético de IEE de hCG Anticuerpo Enzimáticamente Marcado de IEE de hCG Buffer de Ensayo de IEE de hCG Buffer de Lavado de IEE de hCG
Reactivo de Sustrado de IEE Buffer de Sustrado de IEE Buffer de Parada de IEE Muestra QC Interna de IEE de hCG Folleto de instrucciones
(*) calibrados contra OMS IRP 75/537
Equipo Requerido
Tubos de ensayo, pipetas, mezcladora multivortex, separador magnético, baño de maría de 37°C y un colorímetro o espectrofotómetro
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