El ensayo es un IEE competitivo directo para la medición cuantitativa de Progesterona en suero o plasma humano. La Progesterona en la muestra es desplazada de las proteínas enlazantes del suero por un reactivo bloqueador y se enlaza con un anticuerpo monoclonal anti-Progesterona. El complejo se aisla por adsorción a un reactivo de separación magnético de IgG anti-ratón, y los sitios anti-Progesterona desocupados son enlazados a un trazador de Progesterona marcada con fosfatasa alcalina. El ensayo tiene cuatro etapas principales:
El anticuerpo anti-Progesterona, el agente bloqueador y el IgG magnético anti-ratón, se someten a incubación con la muestra (50 µL) durante 2 horas a 37°C, seguida por un paso de lavado magnético.
Las partículas magnéticas se someten a incubación con el trazador de Progesterona marcado con fosfatasa alcalina durante 15 minutos a 37°C, seguida por 2 pasos de lavado magnético.
Se incuba un sustrado enzimático coloreado con las partículas durante 1 hora a 37°C. La presencia de la fosfatasa alcalina provoca un cambio de color de amarillo a rosado. La reacción es terminada por la adición de Buffer de Parada.
Luego los tubos se colocan en el espectrofotómetro o colorímetro. Se puede medir la densidad óptica de cada tubo (a 550nm) y los resultados se calculan usando un programa de procesamiento de datos.
Patrones de IEE de Progesterona Antisuero de IEE de Progesterona Reactivo Bloqueador de IEE de Progesterona Reactivo de Separación de IEE de Progesterona Marcaje Enzimático de IEE de Progesterona Buffer de Ensayo de IEE de Progesterona
Buffers de Lavado de IEE de Progesterona Reactivo de Sustrato de IEE Buffer de Sustrato de IEE Buffer de Parada de IEE Muestra QC Interna de IEE de Progesterona Folleto de instrucciones
Equipo Requerido
Tubos de ensayo, pipetas, mezcladora multivortex, separador magnético, baño de maría de 37°C y un colorímetro o espectrofotómetro
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