El ensayo es un IEE directo competitivo para la medición cuantitativa de Testosterona en suero o plasma humano. Un agente específico desplaza al Testosterona de las proteínas enlazantes, haciéndolo disponible para su enlace con anticuerpos.Luego el Testosterona logra reaccionar con un anticuerpo anti-Testosterona enlazado con isothiocianato de fluoresceína (ITCF) y Testosterona marcado con fosfatasa alcalina.Después, un anticuerpo anti-ITCF enlazado a partículas magnéticas separa el complejo testosterona/testosterona marcado - anticuerpo, de los componentes no enlazados. Una incubación ulterior con sustrato produce color en proporción inversa a la cantidad de testosterone presente. El ensayo tiene quatro etapas principales:
El agente desplazante, testosterona marcado con fosfatasa alcalina y el anticuerpo anti-testosterona conjugado con el ITCF se incuban con la muestra (50 mL) durante 30 minutos a 37°C.
Se añade el anticuerpo anti-ITCF acoplado a partículas magnéticas y se incuba durante 5 minutos a 37°C. Luego se aisla el anticuerpo anti-testosterone mediante un paso de lavado magnético.
Se incuba un sustrato enzimático con las partículas durante 30 minutos a 37°C. La presencia de la fosfatasa alcalina provoca un cambio de color de amarillo a rosado. La reacción se termina con la adición de Buffer de Parada.
Luego los tubos se colocan en el espectrofotómetro o colorímetro. Se puede medir la densidad óptica de cada tubo (a 550nm) y los resultados se calculan usando un programa de procesamiento de datos.
Patrones de IEE de Testosterona Antisuero de IEE de Testosterona Reactivo de Separación de IEE de Testosterona Marca Enzimática de IEE de Testosterona Concentrado de Lavado de IEE de Testosterona
Reactivo de Sustrado de IEE Buffer de Sustrado de IEE Buffer de Parada de IEE Muestra QC Interna de IEE de Testosterona Folleto de instrucciones
Equipo Requerido
Tubos de ensayo, pipetas, mezcladora multivortex, separador magnético, baño de maría de 37°C y un colorímetro o espectrofotómetro