L'essai est un IEE (sandwich) inmunométrique pour mesure quantitative de AFP du serum ou plasma humain. L'échantillon AFP est lié à 2 anticorps anti AFP dirigés vers des epitopes différents. Un anticorps est collé à des particules magnetiiques et l'autre est marqué indirectement avec phosphatase alcaline, qui utilise le système biotin/streptavidin. L'essai a quatre étapes principales:
La anti-AFP magnétique et la anti-AFP biotinilé sont incubées avec échantillon (50µL) pendant 12 - 24 heures à 4 - 8 °C (pendant la nuit dans un réfrigérateur) suivis d'un pas de lavage magnétique.
Les particules magnétiques sont incubées avec streptavidine marqué a phosphatase alcaline pendant 1 heure à 4-8 °C et suivis par deux pas de lavage magnetique.
Un substrat de l'enzyme coloré est incubé avec les particules pendant 30 minutes à 37°C. La présence de phosphatase alcaline provoque un changement de la couleur du jaune au rose. La réaction fini par l'adition de Tampon d'Arrêt.
Les tubes sont placés alors dans le spectrophotometre ou colorimètre. La densité optique (a 550 nm et 492 nm) de chaque tube peut être mesuré et les resultats sont calculés en utilisant un programme pour proceser les données.
Characteristiques Analytiques
Temps de l'incubation
O/N + 30 mins + 30 mins
Rang de l'Étalons
0-360 kU/L Calibré contre 1st Étalon Britanique 72/227
Valeurs Normales
Femme non-enceinte
<25 |kU/L
Limite Inférieure de detection
1 kU/L
Precision
Intra-essai ±1DS
kU/L
%CV
2.3±0.2
6.9
9.0±0.4
4.9
16±0.6
3.7
140±7
5
Precision
Inter-essai ±1DS
kU/L
%CV
2.7±0.3
12.3
9.4±0.3
3.0
16±0.8
4.9
135±12
8.9
Chaque Trousse Contient
Étalons IEE de AFP - see (*) Anticorps Magnetique IEE de AFP Anticorps Biotinilé IEE de AFP Streptavidine Enzymatiquement Marquée IEE de AFP Tampon d'Éssai IEE de AFP Tampon de Lavage IEE de AFP
Reactif de Substrat IEE Tampon de Substrat IEE Tampon d'Arrêt IEE Échantillons QC Interne IEE de AFP Brochure d'Instructions
(*) calibrés contre le 1er. Étalon Britanique 72/227
Materiel Exige
Tubes d'essai, pipettes, agitateur multivortex, séparateur magnétique, bain de Marie à 37°C et colorimètre ou spectrophometre