L'essai est un IEE compétitif pour faire des mesures quantitatives de
Estrone-3-Glucuronide de l'urine humain. Les échantillons de l'urine sont
dilués dans le tampon d'éssai et la Estrone-3-Glucuronide dans
l'échantillon est incubé avec un anticorps lapin anti-Estrone-3-Glucuronide
et un marqueur de Estrone-3-Glucuronide marqué a la phosphatase alcaline.
Séparation du Estrone-3-Glucuronide libre du Estrone-3-Glucuronide lié à
l'antiserum se fait au moyen d'un réactif IgG de séparation magnetique
anti-lapin. Un incubation final avec le sustrat produit coleur à
proportion inverse à la concentration de Estrone-3-Glucuronide present.
L'essai a quatre etapes principales:
Les échantillons de l'urine et les étalons de Estrone-3-Glucuronide sont preparées par dilition dans tampon d'éssai.
Estrone-3-Glucuronide marqué a la phosphatase alcaline, anticorps lapin anti-Estrone-3-Glucuronide et réactif IgG de séparation magnetique anti-lapin sont incubés avec échantillon (500 µL) pendant 2 heures à 37°C suivis par 2 pas pas de lavage magnétique.
Un substrat de l'enzyme coloré est incubé avec les particules pendant 1 heure à 37°C. La présence de phosphatase alcaline provoque un changement de la couleur du jaune au rose. La réaction est terminée par l'addition de Tampon d'Arrêt.
Les tubes sont placés alors dans le spectrophotomètre ou colorimètre. La densité optique (à 492/550nm) de chaque tube peut être mesuré et les résultats sont calculés en utilisant un programme pour processer les données.
Chaque Trousse Contient
Étalon IEE de E1G Antisérum IEE de E1G Reactif de Separation IEE de E1G Marqueur Enzymatique IEE de E1G Tampon d'Éssai IEE de E1G
Tampon de Lavage IEE de E1G Réactif de Substrat IEE Tampon de Substrat IEE Tampon d'Arrêt IEE Échantillons QC Interne IEE de E1G (Bas et Haute) Brochure d'Instructions
Materiel Exige
Tubes d'essai, pipettes, agitateur multivortex, séparateur
magnétique, bain de Marie à 37°C et colorimètre ou spectrophometre