L'essai est un IEE compétitif pour faire des mesures quantitatives de
Pregnanediol-3a-Glucuronide de l'urine humain. Les échantillons de l'urine
sont dilués dans le tampon d'éssai et la Pregnanediol-3a-Glucuronide dans
l'échantillon est incubé avec un anticorps lapin anti-Pregnanediol-3a-
Glucuronide et
un marqueur de Pregnanediol-3a-Glucuronide marqué a la phosphatase
alcaline. Séparation du Pregnanediol-3a-Glucuronide libre du Pregnanediol-
3a-Glucuronide lié à l'antiserum se fait au moyen d'un réactif IgG de
séparation magnetique anti-lapin. Un incubation final avec le sustrat
produit coleur à proportion inverse à la concentration de Pregnanediol-3a-
Glucuronide present.
L'essai a quatre etapes principales:
Les échantillons de l'urine et les étalons de Pregnanediol-3a-Glucuronide sont preparées par dilition dans tampon d'éssai.
Pregnanediol-3a-Glucuronide marqué a la phosphatase alcaline, anticorps lapin anti-Pregnanediol-3a-Glucuronide et réactif IgG de séparation magnetique anti-lapin sont incubés avec échantillon (250 µL) pendant 2 heures à 37°C suivis par 2 pas pas de lavage magnétique.
Un substrat de l'enzyme coloré est incubé avec les particules pendant 1 heure à 37°C. La présence de phosphatase alcaline provoque un changement de la couleur du jaune au rose. La réaction est terminée par l'addition de Tampon d'Arrêt.
Les tubes sont placés alors dans le spectrophotomètre ou colorimètre. La densité optique (à 492/550nm) de chaque tube peut être mesuré et les résultats sont calculés en utilisant un programme pour processer les données.
Chaque Trousse Contient
Étalon IEE de PDG Antisérum IEE de PDG Reactif de Separation IEE de PDG Marqueur Enzymatique IEE de PDG Tampon d'Éssai IEE de PDG Tampon de Lavage IEE de PDG
Réactif de Substrat IEE Tampon de Substrat IEE Tampon d'Arrêt IEE Échantillon QC Interne IEE de PDG (Bas et Haute) Brochure d'Instructions
Materiel Exige
Tubes d'essai, pipettes, agitateur multivortex, séparateur magnétique, bain de Marie à 37°C et colorimètre ou spectrophometre