L'essai est un IEE direct compétitif pour la mesure quantitative de Testosterone du sérum ou plasma humain. Le Testosterone est deplacé des proteines liées par un agent spécifique, en le rendant disponible pour agglutination avec des anticorps. Testosterone réagit alors avec un anticorps anti Testosterone lié à isothiocyanate de fluoresceine (ITCF) et Testosterone marqué avec phosphatase alcaline. Ensuite, un anticorps anti ITCF lié a des particules magnétiques sépare le complexe testosterone/testosterone marqué-anticorps, des composants non liés. Une incubation ultérieur avec du substrat produit la couleur en proportion inverse a la quantité de testosterone présente.
L'essai a quatre étapes principales:
L'ágent déplaceur, testosterone marqué avec phosphatase alcaline et l'anticorps anti-testosterone conjugué à l'ITCF est incubé avec l'échantillon (50µL) pour 30 minutes à 37°C.
L'anticorps ICTF associé aux particules magnétiques est ajouté puis incubé pendant 5 minutes a 37°C. L'anticorps anti-testosterone est isolé alors au moyen d'un pas de lavage magnétique.
Un substrat de l'enzyme colorée est incubé avec les particules pendant 30 minutes à 37°C. La présence de phosphatase alcaline provoque un changement de la couleur du jaune au rose. La réaction est terminée par l'addition de Tampon d'Arrêt.
Les tubes sont placés alors dans le spectrophotométre ou colorimétre. La densité optique de chaque tube (a 550 nm ) peut être mesuré et les resultats sont calculés en utilisant un programme pour procésser les données.
Characteristiques Analytiques
Temps de l'incubation
30 mins + 5 mins + 30 mins
Rang de l'Étalons
0-59 nmol/L 0-17 ng/mL
Valeurs Normales
Homme
8.71-36.47 nmol/L
Femme
<0.35-3.33 nmol/L
Limite Inférieure de detection
<0.3 nmol/L
Precision
Intra-essai ±1DS
nmol/L
%CV
2.2±0.07
3.1
14.3±0.7
4.6
34.6±1.8
5.3
Precision
Inter-essai ±1DS
nmol/L
%CV
8.0±0.4
5.6
15.8±1.5
9.3
30.6±2.0
6.5
Chaque Trousse Contient
Étalons IEE de Testosterone Antiserum IEE de Testosterone Réactif de Séparation IEE de Testosterone Marque Enzymatique IEE de Testosterone Concentré de Lavage IEE de Testosterone Reactiv de Substrat IEE
Tampon de Substrat IEE Tampon d'Arrêt IEE Échantillon QC Interne IEE de Testosterone Brochure d'Instructions
Materiel Exige
Tubes d'essai, pipettes, agitateur multivortex, séparateur magnétique, bain de Marie à 37°C et colorimètre ou spectrophometre